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□ 실시 예 1
○ 시중에서 구입한 느릅나무 껍질, 겨우살이, 천마, 꾸지뽕나무, 산죽잎, 오갈피나무, 머위, 차전자, 소루쟁이, 인동덩굴, 어성초, 광나무열매, 석창포, 마름열매, 일엽초, 까마중, 차가버섯 등 40여 가지 각 약초를 함량에 따라 혼합, 마쇄하여 분말화 하고, 이에 20중량배의 물을 첨가하여 80℃의 온도에서 30시간 동안 추출하였다.
그리고 상기 추출물을 여과하여 여과액을 수득한 후, 이를 감압농축 기(rotary vacuum evaporator)로 감압 농축한 다음, 동결건조기로 동결 건조하여 추출물을 얻었다.
- 생강, 대추 및 감초 등의 약초를 추가로 사용하였다.
- 상기한 약재를 황토로 구성된 보관함에서 40℃로 20일간 보관 후 사용하였다.
□ 시험예 1
○ 전립선암 세포주(DU145), 자궁경부암 세포주(HeLa), 대장암 세포주(HT29), 폐암 세포주(H1299) 등 4종의 암세포주를 사용하여 암세포주의 생육저해활성을 검정하였다.
○ 각 암세포주는 100mm 디쉬로 37℃, 5% CO2 배양기에서 배양하였다. 각 세포주 배양을 위한 배지는 2㎎/㎖ 중탄산나트륨(sodium bicarbonte), 10% 우태혈청(Fetal Bovine Serum) 및 1% 페니실린-스트렙토마이신을 첨가한 DMEM(Dulbeco's Modified Eagle's Medium) 배지를 사용하여 배양하였다.
○ 생육저해활성의 검정은, 배양한 각각의 암세포주를 24웰 플레이트에 배양하고 여기에 각 실시예들을 각각 0, 10, 50, 100, 150, 200, 250 및 300 ㎍/ml의 농도로 처리하여 37℃, 5%의 CO2의 배양기에서 24시간 동안 배양하였다.
○ 배양 후 MTT[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5,-diphenyltetrazolium bromide] 시약 20㎕를 처리하여 4시간 동안 배양한 후 효소면역측정기(ELISA reader) 490nm에서 흡광도를 측정하였으며, 대조군의 흡광도와 비교하여 세포 증식률을 백분율로 환산하였다.
□ 시험예 1
○ 【도 1】은 전립선암 세포주(DU145), 【도 2】는 자궁경부암 세포주(HeLa),
【도 3】은 대장암 세포주(HT29), 【도 4】는 폐암 세포주(H1299)에
대한 시험결과로
본 항암차에 통해 각 악성종양세포주의 증식이 억제됨을 확인하였다.
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□ 또한, 추가적으로 정상세포에 대한 독성을 상기 시험예 1과 같은 방법으로 실험하였으나, 정상세포는 생육저해활성을 보이지 않았다.
□ 시험예 2
○ 방광암 진단을 받고, 방광암 제거 수술을 받은 81세 남성을 피시험자로 하여 다음과 같은 시험을 실시하였다. 방광 내시경 촬영 후, 촬영 당일부터 매일 제조된 차를 매일 2리터 음용토록 한 후, 다시 방광 내시경 촬영을 실시하여 암세포가 확연히 줄어든 것을 확인하였음.
○ 그 이후 본 항암차를 방광암 환자가 스스로 먹는 것을 줄이고 병원에만 의존하자 약 3개월 이후 방광암이 다시 재발하였고, 재발 이후 항암차 먹는 량을 정상량으로 하고 병원 치료를 병행하자 완쾌 판정을 받은 바 있음.
○ 따라서, 본 기능성 항암차는 항암활성의 기능이 있음이 확인되었다.
이상, 본 항암차를 바람직한 예를 사용하여 상세히 설명하였음.
본 항암차의 범위는 아직 특정 실시예에 한정되었지만 항암차의 범위에서 벗어나지 않으면서도 많은 수정과 변형이 가능함. 즉 암의 범위를 확대할 수 있음.
※ 아직 한정된 특정 분야 (암 분야) : 방광, 전입선, 위, 유방, 폐 등으로 한정하여
병원 치료를 병행 한 환자임.
□ 항암차 실험 총론
○ 각종 약재의 열수추출물을 1일 2리터 이상 복용한 후 암세포에 대한 세포성장실험(Cell Proliferation Assay) 분석결과 암세포 사멸효과를 가지는 것으로 확인되었고, 세포 독성 역시 없는 것으로 확인되었음.
○ 따라서, 다양한 암의 치료와 예방 및 전위방지에 효과적인 기능성 차로서 음용될 수 있을 것으로 사료됨. |
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